荧光增白剂百科
荧光增白剂用法用量,荧光增白剂技术百科
中文名称:荧光增白剂28
中文别名:2,2’-(1,2-亚乙烯基)二[5-[[4-[二(2-羟乙基)氨基]-6-(苯氨基)-1,3,5-三嗪-2-基]氨基]]苯磺酸;荧光增白剂;荧光增白 28;荧光增白剂 CBS –X(L);2,5-二(5-叔丁基苯并恶唑-2’-)噻吩;
英文名称:4,4'-bis({4-anilino-6-[bis(2-hydroxyethyl)amino]-1,3,5-triazin-2-yl}amino)stilbene-2,2'-disulfonic acid
英文别名:Fluorescent Brightener 28;FLUORESCENT BRIGHTENER 28;Calcofluor White M2R,Tinopal UNPA-GX;
CAS号:4404-43-7
分子式: C 40H 44N 12O 10S 2
分子量:916.98200。
应用:用于真菌染色。
外观:黄色至灰色粉末
折射率:1.744
熔点:290ºC
密度:1.598 g/cm3
荧光增白剂28(Fluorescent Brightener 28)核酸探针传统的标记物是用放射性同位素,多用32PdNTP、3HdNTP、35SdNTP等。用放射性同位素标记核酸有以下优点:
(1) 灵敏性高:一般可达到0.5~5pg或更低浓度核酸的检测水平,可以检测较少量或拷贝数少的基因组(可延长曝光时间或增敏屏增敏)。
(2) 荧光增白剂28(Fluorescent Brightener 28)特异性高:用放射自显影法,样品中存在的无关核酸或非核酸成分不会干扰检测结果,准确率高,假阳性率低。
(3) 方法简便。所以,放射性同位素标记核酸探针在一些有条件的单位,作为主要的标记方法仍在使用。
RNA定量方法与DNA定量相似。RNA在260nm波长处有*的吸收峰。因此,可以用260nm波长分光测定RNA浓度,OD值为1相当于大约40μg/ml的单链RNA。如用1cm光径,用 ddH2O稀释DNA样品n倍并以ddH2O为空白对照,根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度:
RNA(mg/ml)=40×OD260读数×稀释倍数(n)/1000
RNA纯品的OD260/OD280的比值为2.0,故根据OD260/OD280的比值可以估计RNA的纯度。若比值较低,说明有残余蛋白质存在;比值太高,则提示RNA有降解。
1. 样品量和Trizol的加入量一定要按步骤(1)的比例,不能随意增加样品量或减少Trizol量,否则会使内源性RNase的抑制不完全,导致RNA降解。
2. 实验过程******严格防止RNsae的污染。
3. 荧光增白剂28(Fluorescent Brightener 28)常温运输,室温干燥保存,有效期一年。
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